هيليكيد

طريقة HPLC

(1) الظروف الكروماتوغرافية العمود الكروماتوغرافي: YWCT-C18 (25 سم × 2.6 مم، 10 ميكرومتر) معبأ بطريقة اللب عالي الضغط. الطور المتحرك: ميثانول - ماء (20:80)؛ معدل التدفق: 0.7 مل/دقيقة؛ درجة حرارة العمود: درجة حرارة الغرفة؛ الطول الموجي للكشف عن الأشعة فوق البنفسجية: 270 نانومتر؛ سرعة الورق: 2.5 مم/دقيقة.
(2) تحضير المحلول المرجعي قم بوزن المادة المرجعية من جليكوسيدات فاكهة التوفو بدقة وقم بإعداد محلول 1 ملجم/مل مع 20% ميثانول. قم بوزن البرجينين بدقة وحله مع 20% ميثانول. استخدام حل بالموجات فوق الصوتية لإعداد حل قياسي داخلي يحتوي على حوالي 2mg/ml بيرجينين.
(3) تحضير محلول العينة، قم بوزن حوالي 1 جرام من مسحوق الدواء الخام لفاكهة التوفو المجففة بدقة، ثم ضعه في دورق حجمي سعة 25 مل، وأضف 20 مل من الميثانول وانقعه لمدة 0.5 ساعة، ثم استخرجه بالتذبذب بالموجات فوق الصوتية لمدة 80 دقيقة، ثم بارد، ثم خفف إلى 25 مل باستخدام الميثانول، والمرشح، ويكون الترشيح هو محلول العينة.
(4) التحديد: خذ المحلول المرجعي جليكوسيد التوفو في دورق حجمي سعة 5 مل، وأضف 1.5 مل من محلول البرجينين القياسي الداخلي، وخففه إلى حجم كبير باستخدام 20٪ ميثانول، واخلطه جيدًا؛ خذ 5 مل من محلول العينة، وتبخر حتى يجف، وأضف 1.5 مل من المحلول القياسي الداخلي، وخففه إلى حجم كبير باستخدام 20٪ ميثانول، واخلطه جيدًا. خذ 5 ميكرولتر من المحلول المرجعي ومحلول العينة على التوالي، وقم بالحقن، وتحديد وفقًا للظروف الكروماتوغرافية، وحساب المحتوى حسب نسبة مساحة الذروة.
(5) نتائج التحديد: تم استخدام الطريقة القياسية الداخلية المذكورة أعلاه لتحديد محتوى جليكوسيد التوفو في العينات Ⅰ وⅡ، وكانت النتائج 0.963% و0.928% على التوالي.